VERIFICACION

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  verificacion de un metodo espectrofotometrico
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    INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS LABORATORIO DE MÉTODOS DE ANÁLISIS “ VERIFICACION DEL FUNCIONAMIENTO DE UN ESPECTROFOTÓMETRO ”   PROFESORA: LARIOS SERRATO VIOLETA ALUMNA:  CABRERA RENDÓN CITLALLI ODALIZ COLABORADOR:  PLATA ORTIZ MARIO ALBERTO. EQUIPO:  2 SECCIÓN:  III GRUPO:  5QV2 FECHAS DE REALIZACIÓN:  6 Y 9 DE ABRIL DE 2018. FECHA DE ENTREGA:  13 DE ABRIL DE 2018.  “VERIFICACION DEL FUNCIONAMIENTO DE UN ESPECTROFOTÓMETRO”   FUNDAMETO: El Responsable del Sistema de Gestión de Calidad del Laboratorio (SGC) deberá definir el programa de verificación del equipamiento del laboratorio, en el cual incluirá las actividades a realizar, sus responsables y la periodicidad de los controles. Esta última se define en función de las condiciones de uso y el registro acumulado de funcionamiento de los equipos. Las principales pruebas recomendadas en la bibliografía consultada, para verificar el correcto funcionamiento de un espectrofotómetro incluyen: la exactitud de la longitud de onda, la exactitud y precisión fotométrica, la linealidad fotométrica y la verificación de la luz difusa o parásita.   Control de la exactitud de la longitud de onda La desviación de la longitud de onda puede causar errores en los resultados cuantitativos de la lectura en el UV-Vis. En este control se verifica el grado de concordancia entre la longitud de onda seleccionada para la máxima absorbancia y la longitud de onda de referencia.   Control de la exactitud fotométrica La exactitud fotométrica se determina comparando la absorbancia de una solución de referencia con la lectura de ésta, obtenida en el espectrofotómetro. Para cubrir satisfactoriamente el rango UV-Vis del espectro, se utilizan dos soluciones diferentes: dicromato de potasio, para el espectro UV y sulfato de cobre, para el espectro Vis.   Control de la precisión fotométrica Se denomina precisión fotométrica a la medida de la dispersión de una serie de mediciones de absorbancia alrededor de la media, y se expresa como coeficiente de variación porcentual.   Control de la linealidad fotométrica El estudio de la linealidad fotométrica permite establecer el rango de absorbancia en el que el instrumento tiene respuesta proporcional a los cambios de concentración. Para ello se determina la respuesta del espectrofotómetro a diferentes concentraciones de una sustancia que cumpla con la ley de Lambert-Beer. Se evalúa la linealidad fotométrica realizando lecturas de absorbancia de la serie de soluciones de dicromato de potasio (0,02; 0,04; 0,06; 0,08 y 0,1 g L-1), utilizando la solución de ácido sulfúrico 0,005 mol L-1 para realizar el ajuste a 0 de absorbancia del equipo. Las longitudes de onda a que se realizan las lecturas serán: 235, 257, 313 y 350 nm.   Control de Luz difusa o parásita Se denomina así a toda radiación electromagnética de longitud de onda distinta a la seleccionada por el monocromador, que alcanza el detector y por lo tanto queda registrada por el instrumento. Este control se basa en la medida del porcentaje de transmitancia de una solución de nitrito de sodio 50 g L-1. Esta sustancia tiene la propiedad de que sus soluciones absorben toda la radiación incidente de longitudes de onda menores a los 390 nm, es decir, que es ópticamente opaca a la luz. Por lo tanto, la transmitancia a 340 nm de esta solución debe ser igual a cero, y toda transmitancia detectada corresponde a luz parásita. El ajuste del equipo a 0 de transmitancia se realiza con aire, luego se mide la transmitancia de la solución de nitrito de sodio a una longitud de onda de 340 nm. OBJETIVOS:   Evaluar el funcionamiento del espectrofotómetro HALO VIS-20 DLAB serie PA178AA0000027   Verificar la exactitud de la escala de la longitud de onda y de la exactitud fotométrica.   Verificar la proporcionalidad de respuesta.   Inspeccionar la presencia de luz dispersa.   Verificar el rendimiento global del instrumento.  RESULTADOS: METODO DEL FILTRO DE TIERRAS RARAS (DIDIMIO)   En primera instancia se realizó el método del filtro de tierras raras (didimio), mediante el cual se llevó a cabo la construcción del espectro de transmisión del filtro de didimio colocando en el eje de las abscisas la longitud de onda y en el eje de las ordenadas el % T. Los datos que fueron utilizados para la construcción de esta grafica se muestran a continuación (tabla 1), en los cuales el %T fue medido por el espectro, en este procedimiento se fue incrementando cada vez en 10 nm la longitud de onda en el intervalo 400 a 600 nm (figura 1). a) Llenar la tabla 1 con los datos del porcentaje de transmitancia, obtenidos por el filtro de didimio. Tabla 1. Espectro de transmisión del filtro de didimio.  Longitud de onda (nm) %T 400 110.2 410 84.5 420 30.7 430 9.2 440 19.8 450 14.1 460 10.8 470 26.3 480 57.2 490 21.6 500 1.9 510 0.2 520 22.4 530 79.9 540 84.8 550 35.9 560 0.1 570 0.3 580 0.3 590 0.675 b) Construir el espectro de transmisión del filtro de didimio colocando en el eje de las abscisas la longitud de onda y en el eje de las ordenadas el % T. 110.284.530.7 9.2 19.814.1 10.8 26.357.221.61.9 0.2 22.479.984.835.9 0.1  0.3 0.3 0.675-20020406080100120390 440 490 540 590 640    %    t  r  a  n  s  m   i   t  a  n  c   i  a Longitu de onda (nm) 540 nm 510 nm560 nm440 nm 480 nm 430 nm  Figura 1. Espectro de transmisión del filtro de didimio, mostrando en el eje de las abscisas la longitud de onda y en el eje de las ordenadas el % de transmitancia. Señalando en color rojo las longitudes donde se presentan picos y en color verde donde se presentan valles. Así también señalando en un recuadro las longitudes de onda donde se obtuvieron los máximos valores de transmitancia en color amarillo y en color azul las longitudes de onda donde se obtuvieron los valores mínimos de transmitancia. c) Observar el espectro obtenido y señalar aquellas longitudes de onda donde se presentaron picos y valles. (figura 1). d) ¿coincidieron los máximos y/o mínimos con las longitudes de onda informadas por el fabricante? ¿En que longitudes de onda no fue así? Estos valores no coinciden con los del fabricante puesto que fueron comparados con el grafico teórico mostrado en la figura 2, como podemos observar en el espectro de % de transmitancia se presenta un pico a 400nm y el espectro teórico no lo presenta, coincidiendo únicamente en la longitud de onda de 440nm solo un ligero pico, sin embargo en los demás picos no coincide la longitud de onda. Figura 2. Espectro teórico de transmisión del filtro de didimio. e) Señalar los valores de longitud de onda en donde se obtuvieron los máximos y mínimos de transmitancia en el espectro del filtro de didimio, anotados en la tabla 7. (figura 1). METODO DE LA SOLUCION ESTANDAR (NISO 4 6H 2 O al 20%) Posteriormente se determinaron los valores de %T de la solución de NISO 4 6H 2 O al 20% los cuales son mostrados en la siguiente tabla (tabla 2), esto realizado en un intervalo de longitudes de onda de 380 a 590 nm, incrementando cada 10 nm la longitud de onda, una vez obtenidos estos se llevó a cabo la construcción del espectro de transmisión de dicha solución, mostrando en el eje de las abscisas los intervalos de longitud de onda y en las ejes de las ordenadas el %T (figura 2). a) Informe los valores de %T de la solución de NISO 4 6H 2 O al 20% en la tabla 2. Tabla 2. Espectro de transmisión de la solución de NISO 4 6H 2 O al 20%  Longitud de onda (nm) %T
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